我们的团队可针对 560 余种经过验证的激酶检测体系（包括蛋白激酶与脂质激酶），提供化合物的小规模、中规模及大规模筛选服务。

可用于测定各类抑制剂激酶活性的生化检测方法：

• TR‑FRET、ADP‑Glo
• 检测方案包括单浓度测试、多浓度测试、IC50 量效关系测试
• 小型项目的交付周期为 5 个工作日。

用于选择性筛选的激酶组合方案：

• 全谱筛选组（563 个野生型及突变型激酶）
• 野生型筛选组（389 个野生型激酶）
• 迷你激酶筛选组（73 个激酶）
• 定制筛选组（≥15 个激酶）

检测设置包含单浓度 / 复孔筛选，并设置阳性对照化合物。

选择性筛选的交付周期为 10–15 个工作日，具体取决于筛选组规模。

细胞磷酸化检测通过对底物磷酸化水平进行定量分析，在细胞生理环境下测定激酶活性。

• 可选细胞系包括：
  • 内源性表达激酶靶点的细胞系
  • 激酶敲入表达细胞系
  • 激酶过表达细胞系
• 底物磷酸化可通过多种检测方式进行监测，例如：
  • ELISA
  • 实时成像
  • 高内涵成像（用于磷酸化靶点的定位分析）
  • 信号通路解析
  • 全自动高通量筛选

Ba/F3 致癌驱动基因检测采用基因工程改造的细胞系，使其表达特定激酶并依赖该激酶存活。Ba/F3 检测可对激酶下游信号进行定量分析，从而提供功能性检测结果。

• 已建立 294 种 Ba/F3 细胞系
  
• 检测方式包括：
  • 细胞活力检测
  • 实时成像
  • 小鼠体内试验

NanoBRET 靶点结合（TE）检测通过竞争性置换结合在激酶 ATP 结合口袋的荧光探针，来定量检测受试化合物与靶点激酶的结合能力。

• 已建立 90 余种 NanoBRET TE 细胞系
• 可根据定制化检测需求，由我司团队构建全新 NanoBRET 细胞系
• 支持二元体系或三元体系检测
• 检测指标包括：
  • 结合亲和力
  • 结合动力学
  • 滞留时间
  • 靶点占有率

细胞水平热位移检测（CETSA）通过分析化合物与激酶结合后对复合物的稳定作用，定量测定各类激酶抑制剂的结合亲和力。

• 检测指标包括：
  • 蛋白免疫印迹：原位细胞 Western、Jess 自动化 Western、传统 Western
  • MSD 电化学发光检测（MesoScale Discovery）

康龙化成提供全面的信号通路研究服务，用于评估激酶抑制剂对信号通路的调控作用，并鉴定可有效反映靶点抑制效果的生物标志物。

近端标志物鉴定与筛选方法：

• 反向蛋白芯片（RPPA） 用于磷酸化蛋白质组学研究，可在单张微阵列上同时检测数百种信号蛋白，包括磷酸化靶点蛋白
• 蛋白免疫印迹（手动、Jess 自动化、原位细胞 Western）
• MSD 电化学发光检测
• AlphaLisa、均相时间分辨荧光（HTRF）、酶联免疫吸附测定（ELISA）
• 质谱分析
• 数字 PCR（dPCR）、实时荧光定量 PCR（qPCR）
• 纳米串测序（NanoString）、转录组测序（RNAseq）、全基因组测序（WGS）、全外显子测序（WES）

我们内部生物信息学团队可基于基因组与蛋白质组数据，提供信号调控网络分析服务。